經(jīng)常碰到有臨床醫生向我們檢驗科抱怨，“上次送檢的標本，患者臨床癥狀很重，為什么培養是陰性的？” “明明涂片報告說(shuō)找到菌，培養卻沒(méi)長(cháng)，是不是搞錯了？” “涂片結果和培養結果不一致，到底以哪個(gè)為準？”作為醫院檢驗科微生物人，我們要不厭其煩做好臨床醫生和患者的解釋工作，并時(shí)時(shí)總結經(jīng)驗。在此，我將碰到的情況做一個(gè)總結回顧。

標本為什么不生長(cháng)？

1.有無(wú)用過(guò)抗生素？

患者在微生物標本采樣前如果用過(guò)抗菌藥物，極有可能會(huì )抑制細菌的生長(cháng)甚至不生長(cháng)，出現涂片報告陽(yáng)性結果，而培養陰性的情況。所以盡量在應用抗菌藥物前先采集微生物標本，如果已使用抗菌藥物則根據臨床需要酌情停藥后或下次用藥前采集標本。

2.采集部位是否恰當

眼部標本感染灶小，標本量少，標本采集難度大，采樣不當容易污染培養基，加上患者配合度差的話(huà)，有可能影響涂片和培養的效果。因此采樣人員的操作熟練度很重要。采樣時(shí)優(yōu)先保證培養的需求，因為培養的敏感性要高于涂片檢查。

3.適當的營(yíng)養

不同菌的生長(cháng)對營(yíng)養的要求不一，選擇合適的培養基很重要。比如流感嗜血桿菌，它在感染性眼病中不少見(jiàn)。我們知道嗜血桿菌是一種苛養菌，它的生長(cháng)條件比較苛刻，培養需要V因子和X因子，在普通的血平板上它不生長(cháng)。這時(shí)如果標本只接種于血平板，很可能菌就漏檢了。而巧克力平板含V因子和X因子，適于該菌的生長(cháng)。相似的情況也發(fā)生在淋病奈瑟菌、結核分支桿菌等身上。為防止這樣的情況發(fā)生，我們在標本采集時(shí)就要考慮到這些情況。

4.合適的培養環(huán)境

有些菌它需要在一定的二氧化碳環(huán)境下才能生長(cháng)，甚至是無(wú)氧環(huán)境。而專(zhuān)科醫院受制于規模的限制，往往設備條件要低于綜合性醫院，不一定都有安裝二氧化碳培養箱和厭氧培養箱。這時(shí)可以備一些簡(jiǎn)易裝置以滿(mǎn)足臨床需求，比如燭缸、厭氧發(fā)生袋等。我們有碰到嗜二氧化碳的葡萄球菌，以及一些厭氧菌感染的病例。

5.生長(cháng)的時(shí)間

微生物的報告是有時(shí)間規定的，例如我們醫院眼表普通細菌培養是三天報告，真菌培養為七天。但有些菌生長(cháng)緩慢，可能會(huì )超過(guò)我們常規的報告時(shí)間。比如奴卡菌或者放線(xiàn)菌的生長(cháng)可能會(huì )超過(guò)三天，雜色曲霉、新型隱球菌等真菌生長(cháng)可能會(huì )超過(guò)七天。這時(shí)需要我們延長(cháng)培養時(shí)間，同時(shí)及時(shí)聯(lián)系臨床做好解釋工作。

6.染色的影響

涂片檢查作為培養的補充它有很多優(yōu)勢，比如結果的及時(shí)性，以及能檢出一些不易生長(cháng)的菌。實(shí)驗室有條件的話(huà)可以常規開(kāi)展，和培養一起送檢。像阿米巴、非結核桿菌、諾卡菌，選擇合適的染色方式往往能早于培養明確病因。但涂片檢查影響因素較多。如革蘭染色時(shí)，一些菌因為各種原因（標本厚薄、脫色時(shí)間等），可能染色結果會(huì )陰陽(yáng)不定，影響報告的準確性。而細菌體內體外生長(cháng)形態(tài)不完全一致，出現涂片結果和培養結果不一致的情況。另一方面涂片檢查，尤其是有菌部位的標本，即使檢到菌，也不能明確一定就是致病菌，臨床醫生需正確理解涂片報告單的含義。

7.寄生蟲(chóng)、病毒感染

感染性眼病，除常規可以培養的細菌、真菌、阿米巴等微生物以外，還有一部分如病毒和寄生蟲(chóng)是實(shí)驗室無(wú)法培養報告的，可以利用一些免疫學(xué)方法及基因檢測技術(shù)來(lái)獲取更多的信息。