今天培養基廠(chǎng)家凱林貿易跟大家具體聊聊培養基配制流程和注意要點(diǎn)。

培養基配制程序如下∶

1.將貯存的各種母液按順序依次放好。

2將各種潔凈的玻璃器皿如培養瓶、量筒、燒杯、吸管、玻璃棒、漏斗等，放在指定的位置。準備好蒸餾水或無(wú)離子水及瓶蓋或封口膜、包紙、橡皮筋等。

3.稱(chēng)取規定量的瓊脂和蔗糖，將瓊脂置于精鋼鍋或者電飯煲中，加水至培養基最終容積的3/4或1/2，隨之加熱使之溶解，注意防止湖鍋底和溢出。瓊脂必須完全溶化，以免造成濃度不均。

瓊脂不能過(guò)多，不然會(huì )導致培養基太硬，含水太少，通氣不良;反之，培養基太軟，植物材料則難以固定。由于瓊脂較難溶解，所以在制備培養基時(shí)，應首先加熱溶解。

4.按母液順序，根據不同母液的濃縮倍數移取規定的量，如配制1LMS培養基移取濃縮10倍的大量元素母液為100mL。母液加完后，再經(jīng)過(guò)計算加入所需要的植物生長(cháng)調節劑。

在加入母液或生長(cháng)調節劑時(shí)，應事先檢查這些藥品是否已經(jīng)變色或產(chǎn)生沉淀，若出現這些現象就停止使用。加完后一并倒入已溶化的瓊脂中，并再加入蔗糖。

5.加蒸餾水定容至培養基的最終容積。

6. pH值調整。培養基的pH值(酸堿度)直接影響培養物對離子的吸收，所以過(guò)酸或過(guò)堿都會(huì )影響植物的生長(cháng)。此外，瓊脂培養基的pH值還影響到其凝固程度，所以當培養基配制好以后，應隨即進(jìn)行pH值的調整(一般pH值為5.6-6.0)。

建議是用酸度計測試，即快又準，如無(wú)此設備也可以用精密pH試紙(應在干燥容器中保存，以免吸潮而失效)。若培養基偏酸就用1mol/L的氫氧化鈉來(lái)調節，偏堿則用1mol/L的鹽酸來(lái)調節。

經(jīng)高壓蒸汽滅菌后，由于某些成分的分解(如蔗糖)或氧化，使培養基的pH值會(huì )降低(一般會(huì )降低0.2左右)。有時(shí)玻璃皿質(zhì)量較差，其中一部分物質(zhì)溶解，也會(huì )影響酸度的變化，這些再調整培養基的pH值的時(shí)候都要考慮進(jìn)去。

一般在比較成熟的情況下，會(huì )在培養基高壓蒸汽滅菌前調高一定的pH值，以便適應滅菌后pH值下降的問(wèn)題，具體調高多少可根據自身實(shí)驗摸索。

7.培養基的分裝。瓊脂約在40°℃以下時(shí)凝固，因此配制好的培養基要趁熱分裝，分裝時(shí)一般用燒杯、漏斗直接精選分注。若條件允許，用培養基灌裝機來(lái)分注會(huì )更加方便。

分裝時(shí)要掌握好分注量，多了即浪費又減小培養物的生長(cháng)空間;少了又會(huì )因營(yíng)養不足而影響生長(cháng)，一般以占培養容器1/4- 1/3左右為宜，培養基在培養容器中的厚度約為1.5cm。

分裝時(shí)要注意不要將培養基沾到管壁上，以免引起污染。分裝后立即塞上棉塞或者蓋上瓶蓋或封好封口膜，并在培養瓶上貼標簽或用記號筆在瓶壁上作好標注，然后進(jìn)行滅菌。

培養基配制流程圖如下:

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