培養基的性能測試

1.外觀(guān)控制

制備好的培養基應有相應的顏色，一般的培養基應澄清、無(wú)渾濁、無(wú)沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。

2.污染控制

從每批制備好的培養基中選取部分進(jìn)行污染測試(無(wú)菌試驗)，確定無(wú)微生物生長(cháng)方可使用。

3.性能測試

(1)測試菌株選擇 測試菌株是具有其代表種的穩定特性并能有效證明實(shí)驗室特定培養基最佳性能的一套菌株，應來(lái)自國際/國家標準菌種保藏中心ATCC標準菌株，菌株的選擇參考衛生行業(yè)標準WS/T232-2002《商業(yè)性微生物培養基質(zhì)量檢驗規程》。

(2) 定量測試方法（改良Miles-Misra法） 測試菌株過(guò)夜培養物10倍遞增稀釋;測試平板和參照平板劃分為4個(gè)區域并標記;從高稀釋度開(kāi)始，分別滴一滴稀釋液于試驗平板和對照平板標記好的區域;將稀釋液涂滿(mǎn)整個(gè)1/4區域，37°C培養18小時(shí);對易計數的區域計數，按公式計算生長(cháng)率(生長(cháng)率=待測培養基平板上得到的菌落總數/參考培養基平板上獲得的菌落總數)。非選擇性培養基上目標菌的生長(cháng)率應不低于0.7，該類(lèi)培養基應易于目標菌生長(cháng);選擇性培養基上目標菌的生長(cháng)率應不低于0.1。

(3)半定量測試方法（改進(jìn)的劃線(xiàn)法接種法） 平板分ABCD四區，共劃16條線(xiàn)，平行線(xiàn)大概相隔0.5cm，每條有菌落生長(cháng)的劃線(xiàn)記作1分，每個(gè)僅一半的線(xiàn)有菌落生長(cháng)記作0.5分，沒(méi)有菌落生長(cháng)或生長(cháng)量少于劃線(xiàn)的一半記作0分，分數加起來(lái)得到生長(cháng)指數G。目標菌在培養基上應呈現典型的生長(cháng)，而非目標菌的生長(cháng)應部分或完全被抑制，目標菌的生長(cháng)指數G大于6時(shí)，培養基可接受。

(4)定性測試方法（平板接種觀(guān)察法） 用接種環(huán)取測試菌培養物，在測試培養基表面劃平行直線(xiàn)。按標準中規定的培養時(shí)間和溫度對接種后的平板進(jìn)行培養，目標菌應呈現良好生長(cháng)，并有典型的菌落外觀(guān)、大小和形態(tài)，非目標菌應是微弱生長(cháng)或無(wú)生長(cháng)。

結束語(yǔ)

培養基的質(zhì)量是微生物實(shí)驗室檢測工作的基礎，事關(guān)檢測工作的準確性、可靠性，在微生物實(shí)驗室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個(gè)環(huán)節的質(zhì)量問(wèn)題，都將導致檢驗結果科學(xué)性、客觀(guān)性的偏離。因此，加強培養基的實(shí)驗室質(zhì)量控制，認真地做好培養基的質(zhì)控工作，不斷完善和提高培養基的質(zhì)控水平，才能為微生物檢測實(shí)驗室提供高質(zhì)量的培養基。

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