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傳統的微生物檢測方法,主要有:劃線(xiàn)、涂布和傾注。直接將樣品置于培養基上或培養基中進(jìn)行培養觀(guān)察。
劃線(xiàn)法適合做陽(yáng)性菌接種,同時(shí)適合對單一菌落進(jìn)行分離且聚落形態(tài)呈線(xiàn)性生長(cháng),但劃線(xiàn)法的操作難度大,容易將瓊脂劃破,而且不同菌落使用不同接種環(huán),容易交叉污染。
涂布法是一種簡(jiǎn)單快捷、可用于固體等不可過(guò)濾樣品、適合廣泛的選擇性瓊脂傳統的微生物檢測方法 但它存在技術(shù)不準確、樣品體積有限、無(wú)法除去抑制劑等缺點(diǎn)。
傾注法與涂布法相似,優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單快速,適合廣泛的選擇性瓊脂,可用于固體等不可過(guò)濾樣品,缺點(diǎn)是樣品體積有限,無(wú)法除去抑制劑,無(wú)法觀(guān)察到典型菌落形態(tài),技術(shù)不準確,容易連片。
MNP法(最大可能數法)也稱(chēng)稀釋培養計數,制備三個(gè)連續稀釋級供試液,每一稀釋級取三份一毫升分別接種至三管液體培養基中,培養后觀(guān)察是否有微生物生長(cháng),根據微生物生長(cháng)的管數從表中查需氧菌總數的最可能數。
優(yōu)點(diǎn):傳統方法,廣泛的選擇性液體培養基,用于不同性狀類(lèi)型的產(chǎn)品
缺點(diǎn):,工作量大,多步稀釋和操作,額外的準備和清潔時(shí)間,無(wú)法計數(微生物的可能數量),需要附加實(shí)驗確認
薄膜過(guò)濾法所采用的濾膜孔徑應不大于零點(diǎn)四五pm(該孔徑可以有效截留百分之九十以上的微生物),直徑一般為五十mm。供試品及其溶劑應不影響濾膜材質(zhì)對微生物的截留。使用時(shí),應保證濾膜在過(guò)濾前后的完整性。應注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面,從而使濾膜發(fā)揮最大過(guò)濾效率。
優(yōu)點(diǎn):可將抑菌物質(zhì)沖洗掉,可測試大體積樣品,統計學(xué)意義上更可靠,敏感度高,可達一CFU
缺點(diǎn):只適用可過(guò)濾樣品,固體顆??赡軙?huì )堵膜
總結:根據不同的樣品選擇合適的方法檢測,能夠更加客觀(guān)的反映樣品中微生物的含量,從而制定相應的內控參數以符合樣品放行的標準。
江門(mén)市凱林貿易有限公司是專(zhuān)業(yè)從事微生物診斷試劑及醫學(xué)檢驗儀器生產(chǎn)、研發(fā)、銷(xiāo)售、服務(wù)的醫療器械企業(yè),擁有“民營(yíng)科技企業(yè)”、“高新技術(shù)企業(yè)”、“工程技術(shù)研究中心”、“信用A級企業(yè)”等多項資質(zhì)與榮譽(yù)。